นโยบายการจัดการความรู้ มหาวิทยาลัยสงขลานครินทร์ 1.ให้ใช้เครื่องมือการจัดการความรู้ผลักดัน คุณภาพคน และกระบวนทำงาน 2.ส่งเสริมการแลกเปลี่ยนประสบการณ์การทำงาน จากหน้างาน 3.ส่งเสริมให้มีเวทีเรียนรู้ร่วมกัน

ลูกหว้า
Ico64
Miss Benjaporn Nooklay
นักวิทยาศาสตร์
ศูนย์เครื่องมือวิทยาศาสตร์
เครือข่าย
สมาชิก · ติดตาม: 1 · ผู้ติดตาม: 1

อ่าน: 1009
ความเห็น: 1

การย้อมตัวอย่างทางชีววิทยา

ย้อมโลหะหนักเพื่อเพิ่ม contrast ตัวอย่าง

       การย้อมตัวอย่างที่ผ่านการตัดด้วยเครื่อง ultramicrotome ต้องผ่านการย้อมด้วยโลหะหนักเพื่อเพิ่ม contrast ให้กับตัวอย่าง สำหรับการดู TEM ช่วยให้สามารถมองเห็นรายละเอียดของตัวอย่างได้อย่างชัดเจนขึ้น ซึ่งคล้ายกับตัวอย่างพอลิเมอร์ที่ผ่านการย้อมเช่นเดียวกัน ซึ่งได้เขียนบันทึกไว้แล้ว  การย้อมตัวอย่างพอลิเมอร์สำหรับการทดสอบ TEM

      ซึ่งมีขั้นตอนในการย้อม ดังนี้

1. หยด 5% Uranyl acetate บนแผ่น Parafilm หรือแผ่นขี้ผึ้งที่สะอาด ขนาดของหยดควรมีเส้นผ่าศูนย์กลางประมาณ 0.5-1 เซนติเมตร

2. นำ Grid ที่มี sections มาลอยบนผิวของหยด Uranyl acetate โดยให้ด้านที่มี section คว่ำลง

3. ใช้ภาชนะทึบแสงปิดบริเวณแผ่น Parafilm หรือแผ่นขี้ผึ้งที่มี Uranyl acetate และ Grid ลอยอยู่ ทิ้งไว้ประมาณ 10 นาที

4. ใช้ Forceps ปลายแหลมสะอาดจับ Grid และจุ่มในน้ำกลั่น เพื่อล้างโดยใช้เวลา 30 วินาที (ประมาณ 10-15 จุ่ม)

5. ย้อม Grid ในหยดของ Lead citrate โดยจุ่ม Grid ให้อยู่ภายในหยดของสารละลาย โดยมีเกล็ดของ NaOH วางอยู่ใกล้ๆ หยดของ Lead citrate เพื่อช่วยดูด CO2 อากาศบริเวณนั้นปิดบริเวณหยดสารละลายด้วยฝาของ Petri dish ใช้เวลา 5 นาที

6. ล้าง Grid ด้วย 0.02 N NaOH ประมาณ 30 วินาที

7. ล้างด้วยน้ำกลั่นต้ม 2-3 ครั้งๆ ละ 10 จุ่ม

8. ซับ Grid ให้แห้ง

9. นำไปศึกษาด้วยกล้อง TEM

Sections: พัฒนางานประจำ
License: ซีซี: แสดงที่มา-ไม่ใช้เพื่อการค้า-อนุญาตแบบเดียวกัน Cc-by-nc-sa
created: 10 April 2015 14:26 Modified: 10 April 2015 14:26 [ Report Abuse ]
ดอกไม้
People who like this: Ico24 Monly, Ico24 Our Shangri-La, and 9 others.
People Who Like This
 
Facebook
Twitter
Google

Other Posts By This Blogger

ความเห็น

ถือว่ามีหลายขั้นตอนมากครับ น่าสนใจเขียนบันทึกเป็นซี่รี่นะครับ

 

เอิ้ก เอิ้ก

 

"ใจสั่งมา"

ร่วมแสดงความเห็นในหน้านี้

ชื่อ:
อีเมล:
IP แอดเดรส: 3.237.254.197
ข้อความ:  
เรียกเครื่องมือจัดการข้อความ
   
ยกเลิก หรือ