นโยบายการจัดการความรู้ มหาวิทยาลัยสงขลานครินทร์ 1.ให้ใช้เครื่องมือการจัดการความรู้ผลักดัน คุณภาพคน และกระบวนทำงาน 2.ส่งเสริมการแลกเปลี่ยนประสบการณ์การทำงาน จากหน้างาน 3.ส่งเสริมให้มีเวทีเรียนรู้ร่วมกัน

อั้ม
Ico64
ความเคลื่อนไหวล่าสุด
  • ไม่มี
เครือข่าย
สมาชิก · ติดตาม: 0 · ผู้ติดตาม: 0

อ่าน: 5022
ความเห็น: 3

2D-gel electrophoresis

การทำ 2D-gel electrophoresis มีขั้นตอนการทำงานอย่างไรบ้าง

2D-gel electrophoresis

คำถามจากผู้มาขอใช้บริการ

การทำ 2D-gel electrophoresis มีขั้นตอนการทำงานอย่างไรบ้าง

คำตอบ

จริงๆ แล้ว 2D-gel electrophoresis เป็นชุดเครื่องมือที่ทำงานต่อเนื่องกันโดยเริ่มจาก

1. ขั้นตอนการเตรียมตัวอย่างโปรตีน (Protein extraction and clean-up)

2. การหาปริมาณโปรตีน (2-D Quantification) วัดปริมาณที่ 480 nm

3. ทำการแยกโปรตีนในระนาบที่ 1 โดยใช้ Drystrip ซึ่งปัจจุบันมีขายหลายขนาดด้วยกัน ขึ้นกับการใช้งาน ลักษณะโปรตีนที่ต้องการศึกษา ยิ่ง strip ยาว ก็จะยิ่งแยกโปรตีนได้ชัดเจนขึ้น แต่ราคาก็สูงตามไปด้วย จากนั้นจึงแยกบนเครื่องแยก IEF ซึ่งจะทำการแยกโปรตีนตามประจุ pI ( First dimensional isoelectric focusing gel and First dimensional isoelectric focusing (IEF))

4. ทำการแยกโปรตีนในระนาบที่ 2 โดยใช้ SDS-PAGE ซึ่งขนาดของเจลก็ต้องสัมพันธ์กันกับขนาดของ strip จากนั้นจึงแยกโปรตีนตามขนาด MW ของชิ้นโปรตีน (Gel casting second dimension SDS-PAGE)

5. ย้อมสีโปรตีนในเจล ซึ่งนิยมใช้ Coomassie staining

6. ถ่ายภาพเจล เพื่อนำไปแปลผลกับโปรแกรม (Gels Scan)

7. ทำการแปลผล เปรียบเทียบความแตกต่างกันของโปรตีนในหลายๆ ชนิด (Images analysis)

เครื่องมือประเภทนี้ใช้ในการศึกษาทางด้าน Proteomics ค่ะ

หมวดหมู่บันทึก: เรื่องทั่วไป
สัญญาอนุญาต: สงวนสิทธิ์ทุกประการ Copyright
สร้าง: 20 สิงหาคม 2551 12:00 แก้ไข: 21 มิถุนายน 2552 14:39 [ แจ้งไม่เหมาะสม ]
ดอกไม้
สมาชิกที่ให้กำลังใจ
 
Facebook
Twitter
Google

บันทึกอื่นๆ

ความเห็น

Ico48
อ้น [IP: 58.147.73.3]
04 กันยายน 2551 15:33
#35186

ข้อคุนสำหรับข้อมูลนะคับ

Ico48
X [IP: 40.0.0.92]
10 เมษายน 2552 15:37
#43317
thank you
Ico48
winny_phool [IP: 58.8.195.2]
26 สิงหาคม 2552 00:33
#47665
ขอบคุณมากค่ะ

ร่วมแสดงความเห็นในหน้านี้

ชื่อ:
อีเมล:
IP แอดเดรส: 3.238.190.82
ข้อความ:  
เรียกเครื่องมือจัดการข้อความ
   
ยกเลิก หรือ