HPLC : Detector VWD กับการปรับเปลี่ยนความยาวคลื่นขณะรัน

วันนี้มาเล่าเรื่องราว HPLC Agilent 1100, 1200 ที่มีตัวตรวจวัดสัญญาณชนิด Variable wavelength detector ซึ่งเป็น UV-Vis ที่มีขีดจำกัดคือ วัดได้ที่ละ 1 ความยาวคลื่นเท่านั้น แต่รู้หรือไม่ว่า...เราสามารถ ตั้งค่า Table เพื่อปรับเปลี่ยน ความยาวคลื่น ในแต่ละช่วงเวลาที่ Peak นั้นๆออกมาได้ คล้ายๆกับการกำหนด gradient Mobile phase นั่นเอง บางหน่วยงาน มีแค่ Variable wavelength detector หากสารที่สนใจ มากกว่า 2 ชนิดมีค่าการดูดกลืนที่แตกต่างกันหากต้องการทดสอบทั้งสามชนิดซึ่งสามารถแยกออกมาด้วยสภาวะเดียวกันตลอดการทดสอบ ทำให้ต้องฉีดสารมากกว่า 1 ครั้ง เนื่องจากขีดจำกัดของเครื่องมือ แต่ อย่างที่กล่าวไปข้างต้น ว่า เราสามารถ ตั้งค่า Table เพื่อปรับเปลี่ยน ความยาวคลื่น ในแต่ละช่วงเวลาที่ Peak นั้นๆออกมาได้ ทำให้เราฉีดแค่ครั้งเดียวก็ได้ผลตามต้องการ

ยกตัวอย่างเช่น สาร 2 ชนิด ชนิดแรกดูดกลืนที่ความยาวคลื่น 225 nm อีกชนิดที่ 255 nm ซึ่งสามารถใช้สภาะวะการทดสอบเดียวกันได้ เนื่องจากเวลาที่สารแยกออกมาทั้งสองต่างกัน ชนิดที่ 1 แยกออกมาที่เวลา 1.5 นาที ส่วนชนิดที่ 2 แยกออกมาที่เวลา 5 นาที เป็นต้น มาดูกันว่าต้องตั้งค่าอย่างไร

1. ที่ Detector คลิกเลือก Set up VWD Signal ดังรูป

2. จะได้หน้าต่าง VWD Signal ที่ช่อง Wavelength ให้กำหนดค่าความยาวคลื่น 225 nm ซึ่งเป็นค่าความยาวคลื่นแรกที่สารชนิดที่ 1 ถูกแยกออกมาก่อน ดังรูป

3. จากนั้นให้คลิก Append (หรือ insert)ที่ส่วน Timetable 2 ครั้ง จะได้แถวเพิ่มมา 2 แถว กำหนดเวลา ดัรูป ดังนี้

แถวที่ 1 Time 0  Wavelength 225  (ความยาวคลื่นตรงกับในข้อที่ 2)

แถวที่ 2 Time 3.24 (เวลาหลังจาก 1.5 นาที ก่อน 5 นาที)  Wavelength 255

4. แค่นี้ก็สามารถทดสอบตัวอย่างได้แล้วค่ะ

5. หากไม่ต้องการตั้งค่าเวลาข้างต้น ให้ใช้เม้าทำเป็นแถบดำ แล้ว คลิก Cut  ส่วน Timetable จะหายไป ดังรูป

.............................................................................................................................................................................

บันทึกเกี่ยวกับ HPLC  (ปี 2557 -2560)

HPLC : Mobile phase เก่า-ใหม่

HPLC : How to wash column # 6

HPLC : How to wash column # 5

HPLC : How to wash column # 4

HPLC : How to wash column # 3

HPLC : How to wash column # 2

HPLC : How to wash column # 1

HPLC : STOP รันจาก Control module

HPLC : HPLC 1200 _ แก้ไขตำแหน่งตัวอย่าง M

HPLC : How to connected two Detector

HPLC : VDO ขั้นตอนการเปลี่ยน และประกอบ Active inlet ใหม่

HPLC : ขั้นตอนการถอด Active inlet

HPLC : ขั้นตอน Up date ชั่วโมง Lamp ของ DAD HPLC 1200

HPLC : Active inlet ชำรุด

HPLC : error ALS_วีดีโอประกอบ

HPLC : ขั้นตอน Up date ชั่วโมง Lamp ของ DAD HPLC 1100

HPLC : VDO HPLC Loop sampling with backflush...

HPLC : Leak at Sample loop

HPLC : ฟองอากาศที่ Glass filter solvent inlet

HPLC : วิธีการเปลี่ยน Needle seat

HPLC : วิธีการเปลี่ยน Needle  

HPLC : Leak at detector (VWD)

HPLC : ไม่รับคำสั่ง Start Run _ ประโยชน์ และข้อดีจาก บันทึก share psu

HPLC : UV lamp current

HPLC : Leak ที่ six port valve (Rotor seal)

HPLC : Pressure สูง สาเหตุจาก Guard column_VDO การเปลี่ยน Guard column

HPLC : System suitability test # 6

HPLC : HPLC-2 (35900E Power Fail แบบ Random ขณะรันตัวอย่าง (detector ELSD))

HPLC : HPLC-Agro ความดันหายไปไหน 

HPLC : System suitability test # 5

HPLC : System suitability test # 4

HPLC : System suitability test # 3

HPLC : System suitability test # 2

HPLC : System suitability test # 1

HPLC : Change Active inlet valve

HPLC : Needle seat # 3

HPLC : Needle seat # 2

HPLC : Needle seat # 1

HPLC : Signal option

HPLC : Size % of Page

HPLC : Steps Cleaning Plunger & Support Ring

HPLC : การแยกชิ้นส่วน Pump Head

HPLC : Steps RemoveThe Pump Head

HPLC: Recalibrate

HPLC : Remove GlassFilter Solvent Inlet

HPLC : All the same Scale

HPLC : Copy to Clipboard

HPLC : Check Capillary tube

HPLC : Column + High Pressure

HPLC: Intensity Test Failed

HPLC: Intensity Test Passed….

HPLC : Holmium test, Agilent series , Test Failed

HPLC : Holmium test, Agilent series

HPLC : สาธิตการเปลี่ยน PTFE Frit

HPLC : Calibration curve Based on Height

HPLC : Disconect column

HPLC : การติดตั้งคอลัมน์ # 1

HPLC: no string 8007 & Autostart Macro failed, error # 16419 occurred

HPLC : การเปลี่ยน Mobile phase

HPLC : สาธิตการกรอง Mobile Phase

HPLC : กรองตัวอย่าง

HPLC : ตัวทำละลายกับการเก็บระบบ HPLC

HPLC : S/N กับ LOD และ LOQ

HPLC : Autoinjection

HPLC : Percent (Do not ) Report.

HPLC : Solvent Bottle filling

HPLC: การตั้งชื่อ Subdirectory

HPLC : ไม่แสดงสัญญาณ Online ของ Detector

HPLC : menu integration โดยผู้ใช้เครื่อง

HPLC : กับวิธีการเช็ค detector FLD

HPLC : VDO เปลี่ยน guard column