HPLC : System suitability test # 2

จากบันทึก  HPLC : System suitability test # 1 กล่าวไว้ว่า เป็นกระบวนการตรวจสอบเพื่อให้มั่นใจว่า Chromatograph system (instrument, solvent, column, detector, pump, HPLC condition) เหมาะสมกับสารที่วิเคราะห์

System suitability ทำได้โดยการฉีดสารมาตรฐานที่ทราบความเข้มข้นอย่างน้อย 3 ซ้ำ เพื่อนำข้อมูลมาทำ System suitability ดูค่าต่าง ๆ ว่าเป็นไปตามเกณฑ์หรือไม่

เกณฑ์สำหรับ System suitability มีอะไรบ้าง??????

บันทึกนี้ขอกล่าวถึงเกณฑ์ตัวแรก คือ ค่า N

โดย N หมายถึงจำนวน plate ที่อยู่ภายในคอลัมน์ ซึ่งตามความเป็นจริงแล้วไม่สามารถทราบได้หรือนับได้ว่าในคอลัมน์แต่ละอันจะมีเพลตอยู่เท่าใด ดังนั้น N จึงเป็นจำนวนเพลตที่คำนวณได้ตามทฤษฏี ซึ่งเรียกว่า Theoretical plate จำนวนเพลตจะมีผลต่อลักษณะของพีค ถ้า N มีจำนวนมากๆ จะได้พีคที่มีลักษณะแคบและคมชัด

การฉีดสารมาตรฐานที่ทราบความเข้มข้นอย่างน้อย 3 ซ้ำ เพื่อคำนวณค่า N ด้วยสมการดังข้าล่าง

โดยที่

t_R         =  เวลาของสาร

W_B       =  ความกว้างของฐานพีค

     W_1/2      =  ความกว้างของฐานพีกที่ครึ่งหนึ่งของความสูง

ปัจจุบันด้วยเทคโนโลยีที่ทันสมัย software คำนวณผล HPLC มีโปรแกรมเพื่อคำนวณค่า N อัตโนมัติ กรณ๊ HPLC Agilent สามารถแสดงข้อมูลดังกล่าวได้โดยเลือก data analysis โหลดไฟล์ข้อมูลแต่ละซ้ำของสารมาตรฐานที่ฉีดเพื่อรายงานค่า N โดยเลือก report  > specify report > ส่วน report style เลือก เป็น performance

เมื่อพิมพ์ผลจะแสดงข้อมูลค่า N ของแต่ละพีคมาให้ดังรูป

เกณฑ์การยอมรับ ค่า N > 2000

........................................................................................................................................................

บันทึกเกี่ยวกับ HPLC  (ปี 2557 -2559)

HPLC : System suitability test # 1

HPLC : Change Active inlet valve

HPLC : Needle seat # 3

HPLC : Needle seat # 2

HPLC : Needle seat # 1

HPLC : Signal option

HPLC : Size % of Page

HPLC : Steps Cleaning Plunger & Support Ring

HPLC : การแยกชิ้นส่วน Pump Head

HPLC : Steps RemoveThe Pump Head

HPLC: Recalibrate

HPLC : Remove GlassFilter Solvent Inlet

HPLC : All the same Scale

HPLC : Copy to Clipboard

HPLC : Check Capillary tube

HPLC : Column + High Pressure

HPLC: Intensity Test Failed

HPLC: Intensity Test Passed….

HPLC : Holmium test, Agilent series , Test Failed

HPLC : Holmium test, Agilent series

HPLC : สาธิตการเปลี่ยน PTFE Frit

HPLC : Calibration curve Based on Height

HPLC : Disconect column

HPLC : การติดตั้งคอลัมน์ # 1

HPLC: no string 8007 & Autostart Macro failed, error # 16419 occurred

HPLC : การเปลี่ยน Mobile phase

HPLC : สาธิตการกรอง Mobile Phase

HPLC : กรองตัวอย่าง

HPLC : ตัวทำละลายกับการเก็บระบบ HPLC

HPLC : S/N กับ LOD และ LOQ

HPLC : Autoinjection

HPLC : Percent (Do not ) Report.

HPLC : Solvent Bottle filling

HPLC: การตั้งชื่อ Subdirectory

HPLC : ไม่แสดงสัญญาณ Online ของ Detector

HPLC : menu integration โดยผู้ใช้เครื่อง

HPLC : กับวิธีการเช็ค detector FLD

HPLC : VDO เปลี่ยน guard column