HPLC : All the same Scale

เรื่องเล่า HPLC บันทึกนี้เกี่ยวกับการจัดการข้อมูลโครมาโตแกรม ที่ได้จากการฉีดด้วย HPLC

ผู้ใช้เครื่องมีปัญหาในการปรับเสกลของ report ผลที่ได้ โครมาโตแกรมมีลักษณะเป็นกราฟไม่เต็มเสกล ดังตัวอย่างด้านล่าง จะเห็นได้ว่าพีคทั้งสี่ไม่เห็นยอดพีคทั้งหมดอีกทั้ง เวลาของแต่ละพีคซ้อนทับกับพีคด้วย ซึ่งหาก print ผลออกมาจะให้กราฟที่นำไปใช้งานไม่ได้ ดังนั้นจำเป็นต้องปรับสเกลให้เหมาะสม ซึ่งปัญหาที่เกิดคือ ผู้ใช้เครื่องพยายามปรับสเกลแต่ยังคงไม่เปลี่ยนไปจากเดิม

ปกติในการอบรมใช้เครื่องด้วยตนเองจะมีขั้นตอนการปรับสเกลหากผลที่ได้ไม่เป็นไปตามที่ต้องการซึ่งผู้ใช้เครื่องก็ปฏิบัติตามคู่มือที่ได้ให้ไว้อย่างถูกต้อง นั่นคือ

1. หากต้องการปรับการสเกลของโครมาโตแกรมไฟล์ข้อมูลที่โหลดมา ที่ menu bar เลือก Graphic > Signal Option จะแสดงหน้าต่าง Signal Options

2. เลือกตั้งค่าตัวแปรในหัวข้อ Ranges โดยเลือกเป็น Use Ranges กำหนดค่าของสเกลที่ต้องการในช่อง Min Value และ Max Value ของ Time Range และ Response Range แล้วคลิก OK เพื่อออกกจาก หน้าต่าง Signal Options

แต่ผลปรากฏว่า ให้ลักษณะแสดงดังรูปด้านล่าง คือ ลักษณะสเกลดีขึ้น แต่ที่พีคแรกยังคงมีค่าของเวลา ( Retention time) ซ้อนทับอยู่กับพีค ซึ่งผู้ใช้ไม่ต้องการ ผู้ใช้อยากให้ ค่าของเวลา ไม่ซ้อนทับพีค พยายามปรับค่าเสกลให้มากกว่า 250 ก็แล้ว 400 ก็แล้ว 500 ก็แล้ว ก็ยังคงให้ผลลักษณะแบบเดิม (ทั้งๆที่ จากรูป สเกล สูงสุดที่ประมาณ 150 นั้น)

DaDa เองก็สงสัยว่าเกิดอะไรขึ้น เพราะปกติ นี่คือขั้นตอนการปรับสเกลให้ได้ลักษณะโครมาโตแกรมที่ต้องการ DaDa จึงลองมาไล่ทีละ step จึงพบว่ามีความผิดปกอยู่ตรงที่ส่วน Scale ในหน้าต่าง Signal options ถูกตั้งค่าเป็น Each in full Scale จึงส่งผลให้ไม่ว่าจะปรับเปลี่ยนค่า Use Ranges กำหนดค่าของสเกลที่ต้องการในช่อง Min Value และ Max Value ของ Time Range และ Response Range  เป็นค่าไหนก็ตามโครมาโตแกรมยังคงเดิม ดังนั้นจึงแก้ไข โดย

1. จาก หน้าต่าง Signal Options เลือกตั้งค่าตัวแปรในหัวข้อ Ranges โดยเลือกเป็น Use Ranges กำหนดค่าของสเกลที่ต้องการในช่อง Min Value และ Max Value ของ Time Range และ Response Range

2. ส่วน  scale ตั้งค่าใหม่โดยเลือกเป็น All the same Scale ดังรูป

3. คลิก OK เพื่อออกกจาก หน้าต่าง Signal Options  จะได้ลักษณะโครมาโตแกรมที่เห็นยอดพีคทุกพีคและ ค่าเวลาไม่ซ้อนทับพีคแต่ละพีค ตามต้องการ

เพิ่มเติม ผู้ใช้สงสัยว่าทำไมต้องเลือก Use range จะเลือก Auto scale หรือ Full scale ได้หรือไม่

คำตอบคือ หากไม่สนใจว่าแต่ละพีคอาจเป็นพีคหัวตัด(ไม่เห็นยอดพีค) และ ค่าของเวลาซ้อนทับ และอาจจะมองไม่เห็นเส้น base line สามารถเลือก Auto scale หรือ Full scale ได้ แต่หากสนใจลักษณะพีคที่ต้องการความเหมาะสมเพื่อนำไป report แนะนำให้เลือก Use range ค่ะ

ตัวอย่างหากเลือกเป็น Auto scale

จะได้โครมาโตแกรมลักษณะประมาณดังรูปด้านล่าง

สรุป  : หากต้องการปรับการสเกลของโครมาโตแกรมไฟล์ข้อมูล ที่หน้าต่าง Signal Option ตั้งค่าตัวแปรในหัวข้อ Ranges โดยเลือกเป็น Use Ranges กำหนดค่าของสเกลที่ต้องการในช่อง Min Value และ Max Value ของ Time Range และ Response Range  และ ส่วน  scale ตั้งค่าใหม่โดยเลือกเป็น All the same Scale  จะทำให้ได้ลักษณะโครมาโตแกรมที่ดีตามต้องการ

.....................................................................................................................................................

บันทึกเกี่ยวกับ HPLC  (ปี 2557 -2558)

HPLC : Copy to Clipboard

HPLC : Check Capillary tube

HPLC : Column + High Pressure

HPLC: Intensity Test Failed

HPLC: Intensity Test Passed….

HPLC : Holmium test, Agilent series , Test Failed

HPLC : Holmium test, Agilent series

HPLC : สาธิตการเปลี่ยน PTFE Frit

HPLC : Calibration curve Based on Height

HPLC : Disconect column

HPLC : การติดตั้งคอลัมน์ # 1

HPLC: no string 8007 & Autostart Macro failed, error # 16419 occurred

HPLC : การเปลี่ยน Mobile phase

HPLC : สาธิตการกรอง Mobile Phase

HPLC : กรองตัวอย่าง

HPLC : ตัวทำละลายกับการเก็บระบบ HPLC

HPLC : S/N กับ LOD และ LOQ

HPLC : Autoinjection

HPLC : Percent (Do not ) Report.

HPLC : Solvent Bottle filling

HPLC: การตั้งชื่อ Subdirectory

HPLC : ไม่แสดงสัญญาณ Online ของ Detector

HPLC : menu integration โดยผู้ใช้เครื่อง

HPLC : กับวิธีการเช็ค detector FLD

HPLC : VDO เปลี่ยน guard column