HPLC : Calibration curve Based on Height

บันทึกนี้นำความรู้เกี่ยวกับการใช้โปรแกรมเพื่อคำนวณผลด้วย HPLC มาฝาก

การทดสอบเชิงปริมาณด้วย HPLC หรือแม้แต่ GC จะใช้พื้นที่ใต้พีค (Area) หรือ ความสูง (Height) ในการชี้บ่งเชิงปริมาณ ในการปฏิบัติหากต้องการทราบปริมาณของสารที่สนใจในตัวอย่าง จะต้องฉีดสารมาตรฐานที่ทราบความเข้มข้นแน่นอนอย่างน้อย 5 ความเข้มข้น จากนั้นนำมามาสร้างกราฟมาตรฐาน (Calibration curve) โดย plot ระหว่าง Response ในแกน y และความเข้มข้นในแกน x  ส่วนใหญ่ Response ที่นิยมใช้คือ พื้นที่ใต้พีค (Area) โปรแกรมหลักของ Data analysis สำหรับ HPLC Agilent 1100 /1200  ส่วนการกราฟมาตรฐานจะกำหนดให้ Response ที่ใช้คือ พื้นที่ใต้พีค (Area) เช่นกัน

มีนักศึกษารายหนึ่งซึ่งผ่านการอบรมการใช้เครื่อง HPLC ด้วยตนเองที่ศูนย์เครื่องมือฯ เพื่อกลับไปใช้เครื่องเองที่หน่วยงาน ได้โทรปรึกษา DaDa เพื่อขอคำแนะนำเกี่ยวกับผลการทดสอบและการใช้โปรแกรมว่า

ผลการทดสอบแบบเชิงปริมาณหากต้องการใช้ ความสูง (Height) ในการแปลผลได้หรือไม่ โปรแกรมสามารถทำได้หรือเปล่า ?

DaDa ตอบเลยว่า สามารถใช้ ความสูง (Height) ในการหาปริมาณได้  ส่วนของโปรแกรมคิดว่าน่าจะทำได้เช่นกันแต่ของลองเช็คดูก่อน เพราะไม่เคยลองใช้โหมดของ ความสูง (Height) ในการสร้างกราฟมาตรฐานมาก่อน แต่ DaDa คิดว่าน่าจะไม่ยากในการเปลี่ยน จาก Area เป็น Height ใน calibration table ของโปรแกรม 

เมื่อทดลองปฏิบัติเองตามที่คาดว่าน่าจะต้องไปเปลี่ยนแปลงส่วนไหนของโปรแกรมเพื่อให้ส่วน Calibration table เป็น Height ก็เป็นจริงตามที่คิดไว้ วิธีการง่ายมากและได้สอนวิธีการให้กับนักศึกษารายนี้ผ่านทางโทรศัพท์ ขั้นตอนต้องจัดการจากหน้าต่าง Data analysis ดังนี้

ส่วน Report เลือก Specify report หน้าต่าง Specify report ส่วน Calculate result ส่วนของ Based on ใช้เม้าท์เลือกเป็น Height แทน Area แล้ว OK เพื่อออกจากหน้าต่าง

เมื่อปฏิบัติตามขั้นตอนการสร้างกราฟมาตรฐานพบว่าส่วนของ Calibration table ก็เปลี่ยนจาก Area เป็น Height 

ผลการทดสอบก็แสดงผลเปรียบเทียบด้วย Height เช่นกัน

การโทรสอบถามครั้งนี้สามารถตอบโจทย์ตามความต้องการของผู้ใช้บริการได้

---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------

บันทึกเกี่ยวกับ HPLC  (ปี 2557 -2558)

HPLC : Disconect column

HPLC : การติดตั้งคอลัมน์ # 1

HPLC: no string 8007 & Autostart Macro failed, error # 16419 occurred

HPLC : การเปลี่ยน Mobile phase

HPLC : สาธิตการกรอง Mobile Phase

HPLC : กรองตัวอย่าง

HPLC : ตัวทำละลายกับการเก็บระบบ HPLC

HPLC : S/N กับ LOD และ LOQ

HPLC : Autoinjection

HPLC : Percent (Do not ) Report.

HPLC : Solvent Bottle filling

HPLC: การตั้งชื่อ Subdirectory

HPLC : ไม่แสดงสัญญาณ Online ของ Detector

HPLC : menu integration โดยผู้ใช้เครื่อง

HPLC : กับวิธีการเช็ค detector FLD

HPLC : VDO เปลี่ยน guard column