นโยบายการจัดการความรู้ มหาวิทยาลัยสงขลานครินทร์ 1.ให้ใช้เครื่องมือการจัดการความรู้ผลักดัน คุณภาพคน และกระบวนทำงาน 2.ส่งเสริมการแลกเปลี่ยนประสบการณ์การทำงาน จากหน้างาน 3.ส่งเสริมให้มีเวทีเรียนรู้ร่วมกัน

DaDa
Ico64
Songsuda Promthong
นักวิทยาศาสตร์
ศูนย์เครื่องมือวิทยาศาสตร์ มหาวิทยาลัยสงขลานครินทร์
เครือข่าย
สมาชิก · ติดตาม: 0 · ผู้ติดตาม: 5

อ่าน: 21272
ความเห็น: 2

ช่วยแยกพีก HPLC : จากพื้นที่แชร์ผ่านมายังเมล PSU

HPLC: ช่วยแยกพีกผ่านเมล

 

 

วันนึงช่วงกลางเดือนตุลาคม 2556 DaDa ได้รับเมลเพื่อขอคำแนะนำเกี่ยวกับการแยกด้วย HPLC จากน้องคนนึงซึ่งเค้ารายงานตัวผ่านทางแชร์และเมล DaDa มาว่า ได้ติดตามอ่านบันทึกเกี่ยวกับ HPLC ที่ DaDa เขียนไว้ และตอนนี้ น้องได้ทำงานเกี่ยวกับ HPLC ซึ่งเจอปัญหาปวดให้แก้อยากได้คำแนะนำจาก DaDa

 

ส่วน DaDa ยินดีอยู่แล้วค่ะ การแชร์ แนะนำ ปรึกษา หรือให้ประสบการณ์ที่เราพอจะมีความรู้อยู่บ้าง ยินดีเป็นอย่างยิ่ง ซึ่งเรื่องราวต่อจากนี้เป็นเรื่องเล่าจากการเมลกันไปเมลกันมาระหว่าง DaDa กับ น้องคนนี้ที่เมลมาถามผ่านทาง share psu

 

Subject: ปรึกษาเรื่อง HPLC หน่อยค่ะ

ด้วยข้อความนี้

 

จะขอปรึกษาเรื่องการทำ HPLC หน่อยค่ะ คือหนูมีสาร standard 2ตัว

ที่มีโครงสร้างต่างกัน แค่พันธะคู่และเดี่ยวตำแหน่งเดียวเท่านั้นเลยค่ะ

โดยมีพี่เค้าเคยทำ isocratic 70%ACN แต่ก็ไม่สามารถแยก peak ได้ค่ะ

ตอนนี้หนูกำลังพยายามปรับ gradient mobile phase แล้ว

แต่ก็ยังไม่สามารถแยกได้เลยค่ะ 

พี่ดาดาพอจะมีอะไรแนะนำสำหรับ case แบบนี้ไหมคะ

 

เมื่อได้อ่านเมลในวันนั้น DaDa ก็ ตอบกลับไปทันที

ด้วยข้อความนี้ค่ะ

 

ขอตอบเท่าที่ได้รับข้อมูลจากเมลก่อนนะค่ะ

1. ก่อนอื่นหากมีโครมาโตแกรมให้ดูด้วยจะดีมากเลยค่ะ

2. ได้ลอง ลดความแรงของ ACN ลงบ้างหรือยัง

(ปรับสัดส่วนของ ACN ให้น้อยลงทีละstep นะค่ะ เช่น 60 % ACN เป็นอย่างไร แล้ว 50% ACN เป็นอย่างไร แล้ว 40% ACN เป็นอย่างไร ไปเรื่อยๆนะค่ะ)

3. หรือหากไม่ได้จริงๆ อาจจะต้องเปลี่ยนชนิด Mobile phase

คำแนะนำที่พอจะแนะได้จากข้อมูลที่ได้จากเมล

ลองดูนะค่ะ

 

เมื่อตอบเมลข้างต้นไป DaDa ก็ได้รับเมลตอบกลับมา

ด้วยข้อความนี้ค่ะ


ขอบคุณมากค่ะพี่ดา ถ้าได้ความคืบหน้าหรือสำเร็จยังไง จะรายงานไปนะค้าาา ^____^

 

ผ่านไปหลายวัน DaDa เมลกลับไปถามอีกครั้งว่า    "ได้ผลเป็นอย่างไรบ้าง"

ซึ่ง DaDa ก็ได้รับเมลข้อความกลับมา

ด้วยข้อความนี้ค่ะ

 

ยังไม่ได้เลยค่ะพี่ดา เปลี่ยนเป็น MeOH:H2O และเปลี่ยนเป็น 80% MeOH:H2O แล้ว

และลด flow rate ลงครึ่งหนึ่ง ก็แยกได้มากขึ้นค่ะ แต่ peak ยัง มี baseline

ที่ merge กันอยู่เลย สารสองตัวนี้มีโครงสร้างเหมือนกันมากค่ะ ต่างกันแค่พันธะคู่ตำแหน่งเดียวเลย

พี่ดาพอมีคำแนะนำเพิ่มเติมไหมคะ


ปล. ขอบพระคุณมากนะคะ ที่ถามไถ่ ใจชื้นขึ้นเลยค่ะ

 

จากเมลที่ตอบมาข้างต้น น้องได้ลองปรับเปลี่ยน ตามคำแนะนำ ในครั้งแรก

และให้ผลดีขึ้นแต่ ก็ยังไม่สามารถแยกพีกได้

DaDa จึงถือโอกาสให้กำลังใจและแนะนำเพิ่มเติมสำหรับกรณีนี้

ด้วยข้อความนี้ค่ะ

 

อย่างน้อยก็มีแนวโน้มไปในทางที่ดี นั่นคือ แยกได้มากขึ้น อย่าเพิ่งท้อนะค่ะ

จากทฤษฎีกล่าวไว้ว่าหากต้องการทำให้พีคแยกได้ดี อาจจะต้องปรับปรุง ดังนี้ เช่น

> Change Mobile Phase Composition

> Change to Different Mobile Phase

> Change Mobile Phase pH

> Change Column Temperature

> Use Special Chemical Effects

> Change Stationary Phase

 

อย่างไรก็ตาม อย่างที่แนะนำไป นั่นคือ ลดความแรงของ mobile phase หรือ

เปลี่ยน ชนิดของ mobile phase ก็เป็นหนึ่งในหลักการข้างต้นที่ให้มา

สู้ๆนะค่ะ

 

หลังจากที่น้องได้รับเมลข้างต้นคาดว่าน้องได้ไปหาข้อมูลเพิ่มเติมเกี่ยวกับสารของน้องที่ต้องการแยก

และก็ได้ข้อมูลเพิ่มเติมมาแก้ปัญหาและเมลกลับม

ด้วยข้อความนี้ค่ะ

 

ขอบคุณค่ะพี่ดา

ตอนนี้เจอว่าเค้าใช้ THF ด้วย ยังไม่มี ต้องสั่งซื้อแต่ถ้าออกได้ก็จะฮึดสู้ อิอิ

 ขอบคุณค่ะ

 

ได้อ่านเมลที่ตอบกลับมา DaDa จึงตอบกลับไป

ด้วยข้อความนี้ค่ะ


การใช้ THF จะอยู่ในหัวข้อ  Use Special Chemical Effects /  Mobile Phase pH/ Change Mobile Phase Composition

 ลองดูค่ะ เดินมาถูกทางแล้วนะ สู้ๆค่ะ

 

และเมื่อวานนี้เองที่ DaDa ได้รับเมลตอบกลับมาอีกครั้ง

คาดว่าน่าจะได้ สาร THF และได้ทดลองรันจึงได้ผลออกมา แล้วเมลบอก DaDa

ด้วยข้อความนี้ค่ะ

 

สวัสดีค่ะพี่ดา  มีข่าวดีมาแจ้งค่ะ ^___^

 

peak ทั้งสองยอมแยกจากกันแล้วค่ะ โดยหนูใช้ THF:H2O (5:95) และใช้เป็น isocratic elution

 

 

แค่ได้อ่านจ่าหน้าเมลมาดา ก็ปลื้ม และ ดีใจ แทน น้องเค้าค่ะ

DaDa ดีใจที่เป็นส่วนหนึ่งแม้แค่นิดเดียวที่พอเป็นแนวทางในการช่วยแก้ปัญหาของน้องในครั้งนี้ ที่เหลือคือความพยายามของน้องเอง ดีใจค่ะ

 

จริงๆ ในเมล มีขอคำแนะนำเพิ่มเติมเกี่ยวกับเวลาที่ใช้แยกทั้ง 2 สาร ที่นานเกินไป อยากลดเวลาลง เดี๋ยวค่อย มาแชร์ บันทึกหน้าละกันนะ

 

ขอบคุณพื้นที่แชร์นี้ที่ให้ DaDa ได้มีโอกาสแบ่งปัน แชร์ ความรู้ที่พอจะมีกับคนอื่นเค้าบ้างและช่วยเหลือ แนะนำ สิ่งที่เป็นประโยชน์ต่อผู้อื่น อย่าง น้องคนนี้ ที่เราไม่ได้รู้จักกันเลย แต่ พื้นที่นี้ทำให้เราได้รู้จักกัน ช่วยเหลือ แบ่งปันกัน


หมวดหมู่บันทึก: บริการวิชาการ
สัญญาอนุญาต: ซีซี: แสดงที่มา-ไม่ใช้เพื่อการค้า-อนุญาตแบบเดียวกัน Cc-by-nc-sa
สร้าง: 12 พฤศจิกายน 2556 16:22 แก้ไข: 12 พฤศจิกายน 2556 16:34 [ แจ้งไม่เหมาะสม ]
ดอกไม้
สมาชิกที่ให้กำลังใจ: Ico24 MK, Ico24 Monly, และ 7 คนอื่น.
สมาชิกที่ให้กำลังใจ
 
Facebook
Twitter
Google

บันทึกอื่นๆ

ความเห็น

Ico48
Zenki (ความเคลื่อนไหวล่าสุด)
13 พฤศจิกายน 2556 09:54
#94335

บางข้อความใช้สีตัวอักษรเป็นสีขาว ดูคล้ายข้อความขาดหายไป น่าจะเปลี่ยนเป็นสีอื่นที่เห็นชัดนะครับ

ข้อความที่หายไปเป็นเจตนาหรือเปล่า? เพื่อให้ผู้อ่านได้อ่านเฉลยด้วยการใช้ Mouse highlight เช่น ทดสอบซ่อนข้อความ :)

ร่วมแสดงความเห็นในหน้านี้

ชื่อ:
อีเมล:
IP แอดเดรส: 18.207.130.162
ข้อความ:  
เรียกเครื่องมือจัดการข้อความ
   
ยกเลิก หรือ