นโยบายการจัดการความรู้ มหาวิทยาลัยสงขลานครินทร์ 1.ให้ใช้เครื่องมือการจัดการความรู้ผลักดัน คุณภาพคน และกระบวนทำงาน 2.ส่งเสริมการแลกเปลี่ยนประสบการณ์การทำงาน จากหน้างาน 3.ส่งเสริมให้มีเวทีเรียนรู้ร่วมกัน

DaDa
Ico64
Songsuda Promthong
นักวิทยาศาสตร์
ศูนย์เครื่องมือวิทยาศาสตร์ มหาวิทยาลัยสงขลานครินทร์
เครือข่าย
สมาชิก · ติดตาม: 0 · ผู้ติดตาม: 5

อ่าน: 1896
ความเห็น: 0

Double peak_จาก HPLC

Double peak_จาก HPLC

 

 

มีคำถามถามผ่านทาง share psu ว่า น้องฉีดตัวอย่างด้วยเครื่อง  HPLC agilent 1100 ได้

พีกเป็น  double peak หมดเลยค่ะ ทั้งๆ ที่ก่อนหน้านี้ไม่เคยเป็น พอจะมีวิธีแก้ไขอย่างไรคะ

 

 

จากประสบการณ์ที่ DaDa เคยเจอปัญหาในลักษณะดังกล่าว จะเกิดกับกรณีที่ทดสอบตัวอย่างกลุ่มน้ำตาล เช่น Glucose Fructose เป็นต้น ซึ่งตอนนั้น DaDa แก้ไขโดย การล้างคอลัมน์ (ประมาณ 4-5 ชม.) แล้วทดลองรันใหม่ก็ยังคงได้ double peak ลองล้างคอลัมน์ 24 ชม. พบว่าเมื่อทดลองรันใหม่หลังจากที่ล้างคอลัมน์ค้างคืน ได้พีคที่มีลักษณะ shape กลับมาเหมือนเดิม นั่นคือการแก้ปัญหาจากที่เจอด้วยตนเอง แต่ก็มีอีกหลายสาเหตุไม่ใช่แค่คอลัมน์ดังนั้นจากคำถาม DaDa ได้ให้คำแนะนำในการแก้ปัญหาไปดังนี้

จากข้อมูลที่ให้มา ก่อนอื่นให้น้องย้อนกลับไปดูข้อมูลก่อนหน้านี้ว่า

- ความดัน ปกติ คงเดิมจากครั้งแรกที่ใช้หรือไม่ เปลี่ยนแปลงไปอย่างไร

- เวลา RT ที่สารถูกแยกออกมา เวลาเดิมหรือเปล่า หรือ เวลาเร็วขึ้น / ช้าลง

- สารมาตรฐาน / Mobile phase เตรียมใหม่ๆ หรือ เตรียมไว้นานแล้ว หมดอายุหรือยัง

- คอลัมน์ใช้มานานแค่ไหน

 

ข้อมูลเหล่านี้เป็นส่วนหนึ่งที่ต้องเช็ค ซึ่งอาจจะเป็นสาเหตุที่ทำให้เกิดลักษณะของพีคที่มีความผิดปกติ คือเป็น  double peak ทำให้หาสาเหตุได้ว่า

1. สารมาตรฐานหมดอายุ เสื่อมคุณภาพ หรือ

2. คอลัมน์กำลังเสื่อประสิทธิภาพ ลองล้างคอลัมน์ค้างคืน (ตามคู่มือคอลัมน์) แล้วลองรันใหม่อีกครั้ง อย่าใจร้อนนะค่ะ ค่อยๆแก้ไข ผลอาจจะไม่ออกมาดีในทันที อาจจะต้องใช้เวลา ล้างคอลัมน์ นานหน่อย หรือ คอลัมน์เสื่อม ต้องเปลี่ยนคอลัมน์ใหม่ ทั้งนี้ อย่าลืมเช็ค ส่วนของ guard column ด้วยนะค่ะ อาจจะแค่ guard column มีปัญหา สกปรก ต้องเปลี่ยน guard column ใหม่ก็ได้ หรือ

3. ต้องเตรียมสารใหม่ทั้งหมด

 

ซึ่งสอดคล้องกับข้อมูลจากคู่มือการแก้ปัญหาเกี่ยวกับการวิเคราะห์ด้วย HPLC

ที่ได้โครมาโตแกรมลักษณะของพีคที่มีความผิดปกติ เช่น

ได้พีคแยกเป็นสองพีค (double peak)หรือมีไหล่ มีหลายสาเหตุเช่น

 

* เกิดการอุดตันที่ guard column หรือ column inlet

* เกิดการปนเปื้อนที่คอลัมน์หรือ guard column

* เกิดการเสื่อมสภาพของคอลัมน์หรือ guard column

* เกิดจากการฉีดตัวอย่างที่มีปริมาตรหรือความเข้มข้นมากเกินไป

 

ดังนั้นหากท่านใดมีปัญหาในลักษณะดังที่กล่าวมาก็นำไปแก้ปัญหากันได้นะค่ะ

รวมทั้งหากท่านใดมีประสบการณ์ที่แตกต่างมาช่วยแชร์ก็จะดี

จะได้นำมาแชร์ความรู้ด้วยกัน

หมวดหมู่บันทึก: บริการวิชาการ
สัญญาอนุญาต: ซีซี: แสดงที่มา-ไม่ใช้เพื่อการค้า-อนุญาตแบบเดียวกัน Cc-by-nc-sa
สร้าง: 19 สิงหาคม 2556 14:34 แก้ไข: 19 สิงหาคม 2556 14:36 [ แจ้งไม่เหมาะสม ]
ดอกไม้
สมาชิกที่ให้กำลังใจ: Ico24 ServiceMan, Ico24 คนธรรมดา, และ 5 คนอื่น.
สมาชิกที่ให้กำลังใจ
 
Facebook
Twitter
Google

บันทึกอื่นๆ

ความเห็น

ไม่มีความเห็น

ร่วมแสดงความเห็นในหน้านี้

ชื่อ:
อีเมล:
IP แอดเดรส: 34.231.21.83
ข้อความ:  
เรียกเครื่องมือจัดการข้อความ
   
ยกเลิก หรือ