นโยบายการจัดการความรู้ มหาวิทยาลัยสงขลานครินทร์ 1.ให้ใช้เครื่องมือการจัดการความรู้ผลักดัน คุณภาพคน และกระบวนทำงาน 2.ส่งเสริมการแลกเปลี่ยนประสบการณ์การทำงาน จากหน้างาน 3.ส่งเสริมให้มีเวทีเรียนรู้ร่วมกัน

DaDa
Ico64
Songsuda Promthong
นักวิทยาศาสตร์
ศูนย์เครื่องมือวิทยาศาสตร์ มหาวิทยาลัยสงขลานครินทร์
เครือข่าย
สมาชิก · ติดตาม: 0 · ผู้ติดตาม: 5

อ่าน: 4216
ความเห็น: 3

Sample injection in HPLC

Sample injection in HPLC

 

 

มีผู้สนใจสอบถามมาเกี่ยวกับ "อยากทราบเรื่อง Sample injection in HPLC"

 

Sample injection ใน HPLC  หมายถึง ปริมาณตัวอย่างที่ใช้ฉีดเข้าเครื่อง HPLC

 

การทดสอบตัวอย่างด้วย HPLC ผู้ทดสอบ หรือ ผู้ใช้เครื่องจะต้องทราบสภาวะการทดสอบนั้นๆ

โดยหนึ่งในสภาวะทดสอบที่ต้องคือ ปริมาตรที่ใช้ฉีดสารตัวอย่าง ( Sample injection)

โดยปริมาตรเท่าไร่ละที่จะใช้ ขึ้นกับ Sample loop ของเครื่อง HPLC แต่ละรุ่น / ยี่ห้อ และ ชนิดของตัวอย่างนั้นๆด้วย

 

HPLC บางเครื่อง Sample loop เป็นแบบ fix ปริมาตร

เช่น Sample loop ขนาด 20 ไมโครลิตร ดังนั้น Sample injection ที่ใช้ คือ 20 ไมโครลิตร ด้วยเช่นกัน

ซึ่งส่วนใหญ่จะเป็นเครื่อง HPLC แบบ ฉีด Manual

 

 

HPLC บางเครื่อง Sample loop เป็นแบบ auto สามารถกำหนดปริมาตรที่ฉีดได้ตามต้องการ

แต่ จะมีค่า maximum ที่สามารถฉีดได้สูงสุด

ผู้ทดสอบเองจะต้องรู้ว่า จะฉีดสารตัวอย่างปริมาตรเท่าไหร่เข้าสู่ HPLC

โดยส่วนใหญ่ อ้างอิงตาม Paper ก็ได้ค่ะ หรือทดลองปรับตามความเหมาะสม

 

 

นอกจากนี้  Sample injection เป็นหนึ่งในปัจจัยที่มีผลต่อกระบวนการแยกด้วย HPLC

 

Separation   Parameters   ได้แก่

-Column  Stationary  Phase  Selection

 -Column  Length  and  Diameter

- Mobile Phase  Composition

- Temperature

- Flow   rate

 -Sample  Size ( Sample injection)

 

 

หาก ใช้ Sample injection มาก อาจส่งผลให้สาร overload ได้พีคที่กว้างไม่สมบูรณ์ หรือ สารถูกแยกออกมาจากคอลัมน์ไม่หมดทำให้ตกค้างในคอลัมน์ ส่งผลให้คอลัมน์อุดตัน ความดัน สูงได้

หรือ าก ใช้ Sample injectionน้อยเกินไป ทำให้ไม่สามารถตรวจวัดเจอสารที่ต้องการได้ ทั้งๆ ที่มีสารนั้นๆอยู่

ดังนั้นควรเลือกใช้ Sample injection  ให้เหมาะสมในการฉีดเข้าเครื่อง HPLC

 


หมวดหมู่บันทึก: พัฒนางานประจำ
สัญญาอนุญาต: ซีซี: แสดงที่มา-ไม่ใช้เพื่อการค้า-อนุญาตแบบเดียวกัน Cc-by-nc-sa
สร้าง: 25 ธันวาคม 2555 12:04 แก้ไข: 25 ธันวาคม 2555 12:04 [ แจ้งไม่เหมาะสม ]
ดอกไม้
สมาชิกที่ให้กำลังใจ: Ico24 Our Shangri-La, Ico24 ServiceMan, และ 4 คนอื่น.
สมาชิกที่ให้กำลังใจ
 
Facebook
Twitter
Google

บันทึกอื่นๆ

ความเห็น

Ico48
poupe [IP: 130.208.173.155]
13 เมษายน 2556 00:35
#86618

มีเรื่องรบกวนถามคุณดา การที่เรา run sample อยู่ดีๆ แล้วจู่ พีคของเราหายไป กลายเป็นสัญญาณยึกยัก ลองหยุด run แล้วล้างคอลัมน์ สัญญาณก็ไม่ยอมหาย ไม่ทราบว่าเกิดจากสาเหตุใด และจะมีวิธ๊แก้ปัญหาอย่างไรบ้างคะ ขอบคุณค่ะ

---จาก มือใหม่หัดใช้ HPLC ค่า---

Ico48
DaDa [IP: 171.5.101.167]
13 เมษายน 2556 19:04
#86674

ขอตอบจากข้อมูที่ให้มาก่อนนะค่ะ ข้อมูที่ให้มาค่อนข้างน้อยในการวิเคราะห์ค่ะ ซึ่งปัญหาอาจจะมากกว่านั้นก็เป็นได้

หากกำลังรันแล้วสัญญาณหายไป ตรวจสอบ Detector , คอลัมน์ , Mobile phase , เป็นลำดับแรกๆ จากนั้นให้มาไล่ทีละจุด

อย่างที่บอกข้อมูลประกอการวิเคราะห์ ค่อนข้างน้อย เนื่องจาก DaDa ไม่ได้อยู่หน้างาน ทำให้มองปัญหาไม่ชัดเจน แต่อย่างที่บอก

ให้ตรวจอบเบื้องต้นก่อนนะค่ะ

Ico48
Kiitie [IP: 103.40.137.5]
01 กุมภาพันธ์ 2559 11:49
#104601

ขอสอบถามเพื่อเป็นแนวทางได้ม้ัยค่ะ คือว่าเครื่องมันไม่ยอมฉีดสารให้หน่ะค่ะ มันขึ้นว่า LC error แล้วมันมีข้อความแสดงขึ้นที่ output window ว่า SIL: sample rack is not set property or unknownคุณพอจะเคยเจอปัญหาแบบนี้บ้างมั้ยค่ะ แล้วเราควรจะแก้ไขขั้นพื้นฐานยังไงได้บ้างค่ะ ขอบคุณค่ะ

ร่วมแสดงความเห็นในหน้านี้

ชื่อ:
อีเมล:
IP แอดเดรส: 34.231.21.83
ข้อความ:  
เรียกเครื่องมือจัดการข้อความ
   
ยกเลิก หรือ