นโยบายการจัดการความรู้ มหาวิทยาลัยสงขลานครินทร์ 1.ให้ใช้เครื่องมือการจัดการความรู้ผลักดัน คุณภาพคน และกระบวนทำงาน 2.ส่งเสริมการแลกเปลี่ยนประสบการณ์การทำงาน จากหน้างาน 3.ส่งเสริมให้มีเวทีเรียนรู้ร่วมกัน

DaDa
Ico64
Songsuda Promthong
นักวิทยาศาสตร์
ศูนย์เครื่องมือวิทยาศาสตร์ มหาวิทยาลัยสงขลานครินทร์
เครือข่าย
สมาชิก · ติดตาม: 0 · ผู้ติดตาม: 5

อ่าน: 17758
ความเห็น: 0

วัฏภาคแบบธรรมดากับแบบย้อนกลับ

วัฏภาคแบบธรรมดากับแบบย้อนกลับ

 

 

 

มีคำถามมาจาก web-board ของศูนย์เครื่องมือฯ ถามมาว่า

 

เทคนิคโครมาโทกราฟีของเหลวสมรรถนะสูงแบบวัฏภาคย้อนกลับ C18 ต่างจากแบบธรรมดาอย่างไร


และ คอลัมน์ C18 มีความพิเศษอย่างไร


RP-HPLC มีข้อดีข้อเสียอย่างไร

 

คำตอบมีอยู่ว่า....

 

ระบบในโครมาโตกราฟี ของ HPLC มีหลายระบบด้วยกัน ดังแสดง

 

 

 

ซึ่ง Bonded phase chromatography (BPC) คือ 1 ในระบบในโครมาโตกราฟี

ปัจจุบันนิยมใช้กันมาก นั่นคือ Reversed-Phase (แบบย้อนกลับ) และ  Normal-Phase (แบบธรรมดา)

โดยในคอลัมน์ของ HPLC จะมี silica gel ซึ่งเป็นวัสดุพื้นฐาน

 

Bonded phase chromatography (BPC) แบ่งได้ 2 ชนิดคือ

 

1. Normal phase 

จะใช้เมื่อเฟสคงที่ (stationary phase) มีสภาพมีขั้ว เช่น aminopropyl, silica, cyano, Diol 

และ เฟสเคลื่อนที่ (mobile phase) ไม่มีขั้ว เช่น hexane


 

ตัวอย่างเฟสคงที่ แบบ Normal phase ดังรูป


 

ลำดับการชะ (การแยกที่ได้) ของ Normal phase จะเริ่มจากตัวที่มีขั้วน้อยสุดจะออกมาแรกๆ ดังตัวอย่าง

 

 

 

2. Reversed phase

ใช้กับเฟสคงที่ (stationary phase) สภาพไม่มีขั้ว เช่น octadecylsilane

และเฟสเคลื่อนที่ (mobile phase) มีขั้ว เช่น น้ำ , methanol, acetonitrile  เป็นต้น

 

ตัวอย่างเฟสคงที่ แบบ Reversed phase ดังรูป

 

 

จากรูปข้างบนเราจะเรียกว่า คอลัมน์ C8

หากมีจำนวน C = 18 เราจะเรียกว่า คอลัมน์ C18


ลำดับการชะ แบบ Reversed phase จะเริ่มจากตัวที่มีขั้วมากสุดจะออกมาแรกๆ ดังตัวอย่าง

 

 

ตัวอย่างการระบุชนิดของคอลัมน์ หรือ เฟสคงที่ ( Stationary phase)

 

 

ข้อดีของ Reversed phase-HPLC

1.ค่อนข้างเสถียร

2.เฟสเคลื่อนที่ราคาถูก หาง่าย

3. สมดุลเกิดขึ้นได้เร็วเมื่อถูกใช้กับ gradient elution

หมวดหมู่บันทึก: พัฒนางานประจำ
สัญญาอนุญาต: ซีซี: แสดงที่มา-ไม่ใช้เพื่อการค้า-อนุญาตแบบเดียวกัน Cc-by-nc-sa
สร้าง: 21 พฤศจิกายน 2555 17:36 แก้ไข: 21 พฤศจิกายน 2555 18:12 [ แจ้งไม่เหมาะสม ]
ดอกไม้
สมาชิกที่ให้กำลังใจ: Ico24 Our Shangri-La, Ico24 ServiceMan, และ 4 คนอื่น.
สมาชิกที่ให้กำลังใจ
 
Facebook
Twitter
Google

บันทึกอื่นๆ

ความเห็น

ไม่มีความเห็น

ร่วมแสดงความเห็นในหน้านี้

ชื่อ:
อีเมล:
IP แอดเดรส: 18.207.130.162
ข้อความ:  
เรียกเครื่องมือจัดการข้อความ
   
ยกเลิก หรือ