นโยบายการจัดการความรู้ มหาวิทยาลัยสงขลานครินทร์ 1.ให้ใช้เครื่องมือการจัดการความรู้ผลักดัน คุณภาพคน และกระบวนทำงาน 2.ส่งเสริมการแลกเปลี่ยนประสบการณ์การทำงาน จากหน้างาน 3.ส่งเสริมให้มีเวทีเรียนรู้ร่วมกัน

DaDa
Ico64
Songsuda Promthong
นักวิทยาศาสตร์
ศูนย์เครื่องมือวิทยาศาสตร์ มหาวิทยาลัยสงขลานครินทร์
เครือข่าย
สมาชิก · ติดตาม: 0 · ผู้ติดตาม: 5

อ่าน: 1989
ความเห็น: 1

แรงนักใช่มั้ย...ก็..ลด ลด ลงมาหน่อย

strong solvent กับ weak solvent

 

 

 

มีนักศึกษามาขอคำปรึกษาเรื่องผลที่ได้จากการฉีดด้วยเครื่อง HPLC เมื่อสัปดาห์ที่ผ่านมา

ลักษณะข้อมูลที่ได้คือ (แค่สมมตินะค่ะ ข้อมูลจริงของลูกค้าขอรักษาไว้ค่ะ)  สารผสม 6 ชนิดฉีดด้วยสภาวะ ยกตัวอย่างดังนี้

Flow rate : F

Column : C

Column temp. : T

Detector : D

Mobile phase : Aและ B 

Gradient elution ดังนี้   (ไม่ใช่ข้อมูลจริง แค่ยกตัวอย่างประกอบเท่านั้น)

Time

%A

% B

0

20

80

25

20

80

35

15

85

45

10

90

 

Injection time: 45 min

B คือ Organic solvent (เช่น Methanol , Acetonitrile เป็นต้น)

ซึ่งได้โครมาโตแกรมดังตัวอย่าง (ไม่ใช่ข้อมูลจริงแค่ยกตัวอย่างประกอบเท่านั้น)

 

 

จากรูปเมื่อมานั่งวิเคราะห์ แล้ว ย้อนกลับไปยังสภาวะที่ใช้ฉีด ปัญหา ที่เจอ ดาดา คิดว่า อยู่ที่ การตั้งโปรแกรม Gradient ค่ะ

จากรูป พีค ทั้งหมดถูกแยกมาภายในเวลาไม่เกิน 20 นาที หากดูที่ตัวอย่างตาราง Gradient elution เป็นช่วงการGradient สัดส่วนคงที่ของ A :B (20-80)

แต่ลักษณะพีคที่ได้บางพีคไม่แยกจากกัน  ในขณะเดียวกัน ช่วงเวลาตั้งแต่ นาทีที่ 25 เป็นต้นไป เป็นช่วงของการGradient สัดส่วน A :B ที่เปลี่ยนไป จนถึง 45 นาที ซึ่งไม่มีสารใดถูกแยกออกมาอีก เนื่องจากแยกออกมาหมดตั้งแต่ช่วง 20 นาทีแรก

 

ดังนั้นคำแนะนำสำหรับปัญหานี้คือ

 

ต้องกลับไปปรับสภาวะการตั้ง Gradient ให้เหมาะสมสำหรับที่ช่วงเวลา 0-20 นาทีแรก และไม่จำเป็นต้องฉีดจนถึง 45 นาที เพราะเป็นการเสียเวลาเปล่า รวมทั้งสิ้นเปลืองสารละลายอีกด้วย

 

ลักษณะรูปแบ Gradient สามารถดูได้ ที่นี่ Type of Gradient

 

ซึ่งจากข้อมูลอีกนั่นแหละ พบว่า สัดส่วน A :B (20-80) มีความ Strong strength หรือมีความแรงเกินไป



ทำให้สารบางตัวยังไม่สามารถแยกจากกันได้

ดังนั้น น้องต้องไปซอยย่อย ช่วงเวลาและสัดส่วนการ Gradient ที่ช่วงดังกล่าว

เพื่อลด strength ลง (ทำให้ weak  หรืออ่อนลง)

 

นักศึกษาก็พูดมาว่า จริงด้วยน้องไม่รู้เห็น Paper เค้าบอกมาอย่างนี้น้องก็เลยทำตาม

ดาจึงตอบไปว่า ข้อมูลจากแหล่งต่างๆไม่ว่าจะจาก Paper ก็เป็นส่วนนึงที่ช่วยแก้โจทย์เราได้แต่ไม่ใช่ทั้งหมด

เราต้องรู้จักนำมาประยุกต์ใช้ให้เข้ากับงาน และสิ่งที่เราเจอ ไม่อย่างนั้นเราจะ……...

 

หลังจากวันนั้น ดาก็รอว่านักศึกษาสามารถแก้ไขได้หรือไม่

ซึ่งเมื่อนักศึกษามาใช้เครื่อง พบว่า น้องยังคงสับสน กับการเพิ่ม / ลด strength ของ Mobile phase

ทำให้ไม่สามารถแยกได้ซึ่งเกิดจากน้องนักศึกษา ยังคงให้ความแรง Strength ของ Mobile phase

 ทำให้พีคยังคงรวมอยู่ด้วยกัน ไม่แยก

ดาดา จึงต้องนำข้อมูลมาอธิบาย ว่า กรณีใช้ Reverse phase สำหรับ HPLC  การที่จะลดหรือเพิ่ม Strength ของ Mobile phase  ซึ่งคือ Organic solvent นั้นแต่ละสารมีความแรงอย่างไร ดังตังอย่าง

 

พอยกตัวอย่างน้องจึงเข้าใจ แล้วลองปรับ โดยลดส่วนของ Organic solvent  ลง

ในที่นี้คือ Mobile phase B ให้มีความแรงน้อยลงหรือให้ weak ลง ในช่วง gradient ดังกล่าวนั่นเองพบว่า ได้ผลที่น่าพอใจ สารสผมทั้ง 6 ชนิดแยกจากกันอย่างชัดเจน ดังตัวอย่าง

 

 

วันนั้นเป็นวันที่มีความสุขอีกวันที่มีส่วนช่วยเหลือแม้จะเล็กๆน้อยๆก็ตาม

ขอ สิบเอ็ด นะค่ะ.... อิอิอิ

หมวดหมู่บันทึก: พัฒนางานประจำ
สัญญาอนุญาต: ซีซี: แสดงที่มา-ไม่ใช้เพื่อการค้า-อนุญาตแบบเดียวกัน Cc-by-nc-sa
สร้าง: 04 พฤศจิกายน 2555 08:36 แก้ไข: 04 พฤศจิกายน 2555 08:39 [ แจ้งไม่เหมาะสม ]
ดอกไม้
สมาชิกที่ให้กำลังใจ: Ico24 Our Shangri-La, Ico24 ServiceMan, และ 6 คนอื่น.
สมาชิกที่ให้กำลังใจ
 
Facebook
Twitter
Google

บันทึกอื่นๆ

ความเห็น

เยี่ยมครับ เรื่องเล็กของเราอาจจะยิ่งใหญ่ของใครบางคน

ร่วมแสดงความเห็นในหน้านี้

ชื่อ:
อีเมล:
IP แอดเดรส: 18.207.108.191
ข้อความ:  
เรียกเครื่องมือจัดการข้อความ
   
ยกเลิก หรือ