นโยบายการจัดการความรู้ มหาวิทยาลัยสงขลานครินทร์ 1.ให้ใช้เครื่องมือการจัดการความรู้ผลักดัน คุณภาพคน และกระบวนทำงาน 2.ส่งเสริมการแลกเปลี่ยนประสบการณ์การทำงาน จากหน้างาน 3.ส่งเสริมให้มีเวทีเรียนรู้ร่วมกัน

DaDa
Ico64
Songsuda Promthong
นักวิทยาศาสตร์
ศูนย์เครื่องมือวิทยาศาสตร์ มหาวิทยาลัยสงขลานครินทร์
เครือข่าย
สมาชิก · ติดตาม: 0 · ผู้ติดตาม: 5

อ่าน: 4090
ความเห็น: 3

[M+H] กับ [M+Na] ใน LC/MS

การวิเคราะห์ ด้วย LC-MSผลที่ได้คือ [M+H] กับ [M+Na] มันต่างกันอย่างไร

 

บันทึกนี้มาจากคำถามใน web- board ของศูนย์เครื่องมือฯ อีกแล้วค่ะ

เกี่ยวกับ LC/MS ซึ่งเป็นเครื่องมือที่ใช้แยกสารและหามวลโมเลกุล

สามารถอ่านหลักการทำงานได้ที่นี่นะค่ะ

 

รายงานอบรมการทดสอบทางเคมีด้วยเครื่อง LC-MS / LC-MS-MS -Part I

รายงานอบรมการทดสอบทางเคมีด้วยเครื่อง LC-MS / LC-MS-MS -Part II

 

ส่วนคำถามมีว่าดังนี้ค่ะ

1. อยากทราบว่าในการวิเคราะห์ ด้วย LC-MSผลที่ได้คือ [M+H] กับ [M+Na]มันต่างกันอย่างไรค่ะ

2. แล้วมีหลักเกณฑ์ ในการเลือกที่จะวิเคราะห์มั๊ยว่าตอนไหนวิเคราะห์แบบ[M+H] หรือ [M+Na]

 

ตอบ 1   ในการวิเคราะห์ ด้วย LC-MSผลที่ได้คือ [M+H] กับ [M+Na] มันต่างกันอย่างไร

 

ผลที่ได้แตกต่างกันในส่วนของ  mass spectrum  ซึ่งผลที่ได้แบบทั้ง [M+H] กับ [M+Na] ได้จากการวิเคราะห์แบบ Positive Mode

 

 

ยกตัวอย่างดังรูป

 

 

จาก mass spectrum สารชนิดหนึ่งซึ่งมีมวลโมเลกุล 486 เราทดสอบโดยใช้เทคนิค ESI positive mode
ค่าที่อ่านได้จากสเปคตรัมเป็น 487 m/z
เนื่องจากเทคนิค ESI เป็นแบบ soft Ionization ดังนั้นเส้นสเปคตรัมที่เห็นอันโดดเด่นคือ Molecular ion
ค่ามวลโมเลกุลที่เพิ่มเข้ามา 1 [M+H]+ คือ adduct ion ค่ะ
ในที่นี้ adduct ion คือ H (โปรตอน)
สารประกอบโดยส่วนใหญ่ที่มีมวลโมเลกุลประมาณ น้อยกว่า1000 Da
เมื่อ เกิดปฏิกิริยา Ionization จะแตกตัวให้ประจุเพียงแค่ 1 ประจุ (charge) เมื่อประจุ (z) เท่ากับ 1 ค่าที่อ่านได้จาก mass spectrum คือ m/z = 487
หากต้องการทราบมวลจริงต้อนำมวลที่ได้จาก spectrum ลบด้วยadduct ion ดังนั้นมวลแท้จริง คือ 486 m/z

 

หรือในขณะเดียวกัน

ยกตัวอย่าง

 

จาก mass spectrum สารชนิดหนึ่งซึ่งมีมวลโมเลกุล 492 เราทดสอบโดยใช้เทคนิค ESI positive mode ค่าที่อ่านได้จากสเปคตรัมเป็น 493 m/z ซึ่งคือ [M+H] และยังเจอไอออนที่ [M+Na] อีกด้วยคือ 515 m/z ซึ่งได้จาก M + adduct ion ซึ่ง adduct ion คือ Na ที่มีมวลเท่ากับ 23 ดังนั้นจากตัวอย่างนี้สามารถแตกตัวได้มวล  515 m/z  (492+23) เป็น mass spectrum

หรือ อาจมีโอกาส มวล  515 m/z [M+Na] ซึ่งเป็นไออนที่เด่นกว่าก็เป็นได้  ดังรูปข้างล่าง

 

ทั้งนี้ขึ้นอยู่กับลักษณะการแตกตัวเป็นไอออนและการตอบสนองสัญญาณที่ได้

 

ตอบ 2  แล้วมีหลักเกณฑ์ ในการเลือกที่จะวิเคราะห์มั๊ยว่าตอนไหนวิเคราะห์แบบ[M+H] หรือ [M+Na]

จากข้อมูลข้างต้น คำตอบคือไม่จำเป็นต้องเลือกว่าว่าตอนไหนวิเคราะห์แบบ[M+H]หรือ [M+Na]

เพราะ การที่จะได้ผลแบบ [M+H]หรือ [M+Na] ขึ้นอยู่กับลักษณะการเกิดไอออนของสารนั้นๆเอง

แต่ต้องทราบการหานำหนักมวลที่แท้จริงให้ได้ว่าสเปกตรัมที่ทดสอบได้มานั้นได้จากมวลที่แท้จริง บวก adduct ion ตัวไหน คือ บวก +Hหรือ +Na

 

 

 

หมวดหมู่บันทึก: พัฒนางานประจำ
สัญญาอนุญาต: ซีซี: แสดงที่มา-ไม่ใช้เพื่อการค้า-อนุญาตแบบเดียวกัน Cc-by-nc-sa
สร้าง: 21 ตุลาคม 2555 10:22 แก้ไข: 21 ตุลาคม 2555 10:26 [ แจ้งไม่เหมาะสม ]
ดอกไม้
สมาชิกที่ให้กำลังใจ: Ico24 Our Shangri-La, Ico24 iHum, และ 4 คนอื่น.
สมาชิกที่ให้กำลังใจ
 
Facebook
Twitter
Google

บันทึกอื่นๆ

ความเห็น

Ico48
จุฬารัตน์ [IP: 101.109.119.249]
27 ตุลาคม 2555 16:42
#81480

อยากทราบว่า LC MS วิเคราะห์หาสารเคมีอะไรได้มั่งคะ

ในเลือดและปัสสาวะ

สารทุกตัวที่มีคุณสมบัติตอบสนองต่อ MS สามารถตรวจวัดได้ค่ะ

Ico48
Lalita [IP: 10.148.116.23]
08 กุมภาพันธ์ 2560 15:29
#105886

อยากทราบว่าถ้าประจุของสาร +2 จะมีเกณฑ์คำนวณค่า M/Z อย่างไร แล้วถ้าสารที่วิเคราะห์มีน้ำหนักโมเลกุลเท่ากันจะรู้ได้อย่างไรว่าเป็นตัวไหน ดูจากลักษณะพีคหรือเปล่าค่ะ ช่วยยกตัวอย่างให้เห็นสักตัวอย่างจะได้หรือเปล่าค่ะ

อีกคำถามคือ LC-MS รายงานผลในหน่วยอะไรค่ะ

ขอบคุณค่ะ

ร่วมแสดงความเห็นในหน้านี้

ชื่อ:
อีเมล:
IP แอดเดรส: 34.225.194.144
ข้อความ:  
เรียกเครื่องมือจัดการข้อความ
   
ยกเลิก หรือ