เหตุเกิดจากน้ำและบัฟเฟอร์

2. เมื่อสั่ง RUN สารมาตรฐานไม่เจอพีค ของสารเลย และลองสั่ง RUN ตัวอย่างก็เช่นเดียวกัน ทั้งๆที่ก่อนหน้านั้น (1 สัปดาห์ก่อนหน้า) ยังเจอพีคที่ต้องการฉีดสารมาตรฐานแล้วไม่เห็นสัญญาณ โครมาโตแกรม หรือ พีค ของสารมาตรฐาน หรือตัวอย่างเลย ดังรูป

ดาดา จึงเข้าไปดู

1.               ดาดา เช็คว่า สาย Capillary tube ที่ต่อจากคอลัมน์สู่ Detector ถุกต้องหรือไม่ พบว่า ต่อเข้าถูกต้องกับ Detector ที่ใช้งานคือ FLD (Fluorescence Detector) จึงตัดปัญหาเรื่องสัญญาณไม่พบ จากบันทึก Chromatogram ที่หายไป

        2.               ดาดา เช็ค purge valve พบว่าลูกค้าปิด purge valve ผลไม่สนิททำให้ ความดัน    น้อยกว่าเดิม เมื่อปิด purge valve สนิท พบว่าได้ความดันกลับมาเท่าเดิมจากที่ลูกค้าเคยใช้ (ประมาณ 60-70 bar) ดาดา เลยให้ลูกค้าลองฉีดสารมาตรฐานอีกครั้ง แต่ พบว่า ยังคงไม่เห็นสัญญาณโครมาโตแกรมเช่นเดิม.....งง.... 

สอบถามลูกค้าอีกครั้งว่า สภาวะที่ใช้เหมือนเดิมหรือเปล่า ลูกค้า ตอบว่า เหมือนเดิม สารมาตรฐานก็เหมือนเดิม เพิ่งเตรียมใหม่เมื่อเช้าก่อนมาใช้เครื่อง และมั่นใจว่าเตรียมถูกต้อง รวมทั้งตัวอย่างก็เช่นกัน ทั้งๆที่ปกติจะมีพีคหลายพีค แต่ก็ไม่เห็นสัญญาณอะไรเลยจากตัวตรวจวัด ...สอบถามต่อ..เรื่องตัวทำละลายเคลื่อนที่ (Mobile phase) ลูกค้าบอกว่าใช้ Acetonitrile HPLC grade และน้ำ ดาดาเลยถามต่อว่า น้ำเตรียมเมื่อไหร่เปลี่ยนใหม่ทุกวันมั้ย ลูกค้าบอกว่า น้ำนี้น้องใช้มาหลายครั้งแล้วเตรียมและใช้มาหลายสัปดาห์แล้ว สัปดาห์ที่แล้วก็ใช้ก็ยังแยกได้เห็นพีคทุกพีคที่มีในตัวอย่างและสารมาตรฐาน จึงได้รู้ว่าน้ำที่ลูกค้าบอกมานั้นมีกรด acetic ผสมอยู่ด้วยและได้เตรียมมาเป็นระยะเวลานานแล้วแต่ยังคงใช้งาน และลุกค้าคิดว่าไม่น่าจะมีปัญหาเพราะเมื่อสัปดาห์ก่อนก็ใช้แต่ยังคงแยกและให้โครมาโตแกรมได้

ดาดาเลยแนะนำลูกค้าว่าสาเหตุน่าจะเกิดจากตัวทำละลายเคลื่อนที่คือน้ำที่มีกรดอะซิติกผสมอยู่ โดยปกติการใช้สารที่เป็นกรด บัฟเฟอร์ น้ำ จำเป็นต้อง เตรียมใหม่ๆ ไม่เตรียมทิ้งไว้นานๆ เพราะจะมีผลให้ค่า pH และคุณสมบัติ ทางเคมีเปลี่ยนไป จึงมีผลให้การแยกของลูกค้าในวันนั้นไม่สามารถตรวจวัดสัญญาณได้เลย

ข้อมูลบางส่วนจาก data sheet ของคอลัมน์ยี่ห้อหนึ่ง

โดย ดาดาเลือก Method ที่ใช้สอบเทียบเครื่อง HPLC1 มาใช้ในการรีเช็คพบว่า ได้สัญญาณโครมาโตแกรมทุกพีคของสารที่ใช้สอบเทียบดังรูป

เมื่อผลออกมาว่าเครื่องมือยังคงสามารถใช้งานได้ ดาดา จึงได้แจ้งผลการทดสอบของดาดาให้ลูกค้าทราบ

3.               ลูกค้าจึงเตรียมตัวทำลายน้ำที่มีกรดอะซิติกผสมอยู่ มาทดสอบใหม่อีกครั้ง พบว่า สามารถแยกสารมาตรฐานและตัวอย่างได้ตามที่ต้องการ ดังรูป