นโยบายการจัดการความรู้ มหาวิทยาลัยสงขลานครินทร์ 1.ให้ใช้เครื่องมือการจัดการความรู้ผลักดัน คุณภาพคน และกระบวนทำงาน 2.ส่งเสริมการแลกเปลี่ยนประสบการณ์การทำงาน จากหน้างาน 3.ส่งเสริมให้มีเวทีเรียนรู้ร่วมกัน

DaDa
Ico64
Songsuda Promthong
นักวิทยาศาสตร์
ศูนย์เครื่องมือวิทยาศาสตร์ มหาวิทยาลัยสงขลานครินทร์
ความเคลื่อนไหวล่าสุด
เครือข่าย
สมาชิก · ติดตาม: 0 · ผู้ติดตาม: 5

อ่าน: 38879
ความเห็น: 13

Detector (ตัวตรวจวัด ) สำหรับ HPLC .....ตอนที่1

Detector หรือ ตัวตรวจวัดสัญญาณ มีหลายชนิดด้วยกัน

HPLC : Agilent 1100

หลังจากทำความรู้จักกับ HPLC แล้ว มาทำความรู้จักกับ  ตัวตรวจวัดสัญญาณ ของ HPLC กันต่อนะคะ

Detector หรือ  ตัวตรวจวัดสัญญาณ สารที่ได้จากการแยก มีหลายชนิดด้วยกัน 

1. Variable wavelength detector (VWD) 

เป็น detector ที่วัดค่าการดูดกลืนแสงของสาร
ซึ่งสารหรือตัว analyte จะต้องมีหมู่ที่สามารถให้ค่าการดูดกลืนแสงได้ เรียกว่า Chromophore


 

และ detector นี้สามารถเลือกความยาวคลื่นที่ต้องการที่สารดูดกลืนแสงได้ดีที่สุด
โดยเป็น detector ที่อ่านได้ทีละ 1 ความยาวคลื่นมี light source เป็น deuterium lamp
อ่านค่าได้ตั้งแต่ 190-600nm เมื่อ light source ปล่อยแสง
ซึ่งเป็น Polychromatic( คือเป็นแสงที่ประกอบด้วยแสงที่มีความยาวคลื่นต่างๆกัน )
       ถูกโฟกัสผ่านไปยัง monochromator คือ entrance slit ผ่านไปยัง mirror ( ทำให้แสงเกิดการสะท้อน)
ไปยัง grating (ส่วนที่ทำให้แสงกระจายออกเป็นความยาวคลื่นต่างๆเพื่อให้เหมาะในการเลือกใช้งาน)
 ไปยัง exit slit แล้วผ่านเข้าสู่ flow cell และมีการดูดกลืนแสงภายใน flow cell
และถูกตรวจวัดค่าการดูดกลืนแสงของสารตัวอย่าง ออกมาเป็นสัญญาณ โครมาโตแกรม
 ตัวอย่างที่เหมาะกับ detector นี้ ต้องเป็นตัวอย่างที่สามารถดูดกลืนแสงได้นั่นคือต้องมีหมู่ Chromophore เช่น วิตามิน ต่างๆ

 

2.    Diode array detector ( DAD )

เป็น detector ที่วัดค่าการดูดกลืนแสงของสาร เช่นเดียวกับ VWD แต่ต่างกันตรงที่
สามารถวัดได้ทีละหลายความยาวคลื่นในเวลาเดียวกัน และวัดได้ตั้งแต่ 190-850 nm
ระบบการเดินทางของแสงจะเป็นแบบย้อนแสง Reverse optics คือ
แสงจากแหล่งกำเนิดแสง light source จะผ่านไปยัง flow cell ก่อนที่จะผ่านไปยัง
monochromator คือ slit และ grating เมื่อแสงตกกกระทบบน grating
แสงจะกระจายออกเป็นความยาวคลื่นต่างๆ แล้วไปตกกระทบบนแผงของ Diode array
ตรวจวัดสัญญาณออกมาเป็นโครมาโตแกรม  Diode array detector สามารถเก็บข้อมูล spectrum
 ของ พีกต่างๆ ของโครมาโตแกรมได้ด้วย
ตัวอย่างที่เหมาะกับ detector นี้ ต้องเป็นตัวอย่างที่สามารถดูดกลืนแสงได้เช่นเดียวกับ VWD
 

 

3.  Fluorescence Detector (FLD) 

 

เป็น detector ที่มีความไวสูงและเฉพาะ ( selective) เนื่องจากมความสามารถในการวัด
Fluorescence ที่ได้ออกมาจากตัวอย่าง ที่ถูกกระตุ้น (excited) ด้วยแสงยูวี
โดยที่แสงยูวีจากแหล่งกำเนิดแสง light source ผ่านเครื่องกรองแสงคือ
monochromator เพื่อให้แสงที่มีความยาวคลื่นตามต้องการผ่านเข้าไปยัง flow cell
ที่มีสารตัวอย่างที่ออกมาจากคอลัมน์ เมื่อตัวอย่างถูกกระตุ้นด้วยแสงยูวี จะปล่อย emission
ออกมาทุกทิศทางแต่จะมีemissionที่ทำมุม90องศาเท่านั้นซึ่งเป็นความยาวคลื่นเฉพาะ
สำหรับตัวอย่างแต่ละชนิด ผ่านไปยัง filter ตัดแสงที่ไม่ต้องการออก
จากนั้นจึงผ่านเข้าไปยัง photo cell ตรวจวัดสัญญาณออกมาเป็นโครมาโตแกรม
ดังนั้นทั้งความยาวคลื่น excitation และ emission จึงเป็นความยาวคลื่น
ที่เป็นลักษณะจำเพาะกับตัวอย่างนั้นๆเท่านั้น 

 

ต่อ..ตอนที่ 2 >>>

หมวดหมู่บันทึก: บริการวิชาการ
สัญญาอนุญาต: สงวนสิทธิ์ทุกประการ Copyright
สร้าง: 24 พฤศจิกายน 2550 21:47 แก้ไข: 28 กุมภาพันธ์ 2551 11:05 [ แจ้งไม่เหมาะสม ]
ดอกไม้
สมาชิกที่ให้กำลังใจ: Ico24 MK, Ico24 tiny apple, และ Ico24 เห็ดเผาะ.
สมาชิกที่ให้กำลังใจ
 
Facebook
Twitter
Google

บันทึกอื่นๆ

ความเห็น

ถ้านักศึกษาเข้ามาอ่านได้ก็ดีเน๊อะ
Ico48
น.ศ.งับ [IP: 125.25.200.216]
28 มกราคม 2551 00:57
#17109

ขอบคุณมากนะครับ ข้อมูลนี้ช่วยได้มากเลยครับ

ป๋มกำลังหาข้อมูลเกี่ยวกับเครื่องมืออยู่ครับ

Ico48
พาตีฮา [IP: 192.168.128.10]
12 กุมภาพันธ์ 2551 11:09
#20032

ขอบคุณนะคะที่ให้ความรู้หายากมากค่ะเว็บที่เป็นภาษาไทย

Ico48
DaDa (ความเคลื่อนไหวล่าสุด)
12 กุมภาพันธ์ 2551 15:26
#20082
ยินดีเป็นอย่างยิ่งจ้า
Ico48
นักศึกษา [IP: 118.172.235.171]
28 พฤศจิกายน 2551 21:38
#38662

อยากรู้ข้อดีข้อเสียของ

DAD (diode  array  detector) และ PMT(Photomultiplier  tube) อะค่ะ

ช่วยหนูทีนะค่ะ

Ico48
นิสิต [IP: 58.147.85.3]
02 มีนาคม 2552 11:40
#41750
ขอบคุณมากนะคับ
Ico48
nathi [IP: 202.28.245.241]
19 มิถุนายน 2553 05:45
#58034

การตั้งค่า DAD ที่ใช้กับ HPLC จะมีให้ตั้งค่า refence wavelenght ด้วย จะทราบได้อย่างไรค่ะว่าต้องตั้งเท่าไหร่  เมื่อค่า sample wavelenght = 470 nm

Ico48
นศ [IP: 172.24.31.69]
25 กรกฎาคม 2554 20:59
#66903

แล้ว ELSD อุ่ะค่ะ เป็นอย่างไร

Ico48
โอ [IP: 180.183.181.97]
29 กรกฎาคม 2555 09:01
#79293

mAU มีชื่อเต็มอะไรคับ แล้วว มันคือค่าอะไร ขอบคุณคับ

Ico48
DaDa [IP: 192.168.53.127]
31 กรกฎาคม 2555 12:01
#79355

หน่วยของการตอบสนองของสัญญาณตัวตรวจวัด ค่ะ

ตอบคุณ nathi อ่านคำตอบ ที่นี่ ค่ะ

Ico48
DD [IP: 119.42.97.161]
17 กรกฎาคม 2556 16:52
#90698

อยากรู้ข้อดีข้อเสียของ

DAD (diode array detector) อ่ะค่ะ เปรียบเทียบกับ Fluorescence Detector (FLD)

Ico48
worawut pn [IP: 202.41.184.124]
15 สิงหาคม 2561 16:03
#108200

3. Fluorescence Detector (FLD) ขอบคุณสำหรับข้อมูลดีๆครับ

จากข้อความข้างบน "เมื่อตัวอย่างถูกกระตุ้นด้วยแสงยูวี จะปล่อย emission

ออกมาทุกทิศทางแต่จะมีemissionที่ทำมุม90องศาเท่านั้นซึ่งเป็นความยาวคลื่นเฉพาะ

สำหรับตัวอย่างแต่ละชนิด" ส่วนที่ทำการวัดแสงที่เกิด emission ที่ทำมุม90องศา เป็นเพราะว่าการวัดแสงที่90องศาจะไม่ได้รับการรบกวนจากแสงจากแหล่งกำเนิด(จากรูปก็สีเขียวๆครับ) ดังนั้นจึงทำการวัดที่90องศาจะดีที่สุดเพราะสารตัวอย่างจะปล่อย emission

ออกมาทุกทิศทางเท่าๆกัน ถ้าผิดพลาดก้ขออภัยด้วยนะครับ

ร่วมแสดงความเห็นในหน้านี้

ชื่อ:
อีเมล:
IP แอดเดรส: 54.196.190.32
ข้อความ:  
เรียกเครื่องมือจัดการข้อความ
   
ยกเลิก หรือ